在注射劑及無菌制劑（如滴眼液、燒傷制劑等）的生產(chǎn)中，包裝密封性是確保藥品安全、穩(wěn)定及質(zhì)量的關(guān)鍵屏障。浸入式微生物暴露試驗作為一種重要的密封性驗證方法，通過模擬微生物侵入場景，評估非透氣性包裝容器的密封性能。本文將由濟南三泉中石深入探討該試驗的原理、操作流程及結(jié)果判定標準，為藥品生產(chǎn)企業(yè)、檢測機構(gòu)及科研單位提供實用參考。

適用范圍

浸入式微生物暴露試驗適用于非透氣性注射劑包裝系統(tǒng)的密封性驗證與研究，涵蓋軟包裝袋、泡罩包裝、藥瓶等多種包裝形式。該方法可用于：

1. 密封工藝驗證：評估包裝設計及生產(chǎn)工藝的可靠性。

2. 靈敏度對比研究：比較不同檢測方法的有效性。

3. 風險評估：分析微生物侵入包裝的可能性。

需要注意的是，該方法不適用于最終產(chǎn)品的常規(guī)放行檢測或在線監(jiān)測。可使用三泉中石的MFY-HS微生物侵入法密封性試驗儀，支持色水法及微生物侵入試驗，具備正壓與負壓測試功能，廣泛應用于制藥、質(zhì)檢及藥物研發(fā)領域。

核心術(shù)語解析

為確保試驗的科學性與一致性，以下關(guān)鍵術(shù)語需明確：

最大允許泄漏限值：包裝容器允許的不會影響藥品質(zhì)量的最大漏孔尺寸或泄漏率。

包裝密封性：指包裝系統(tǒng)防止內(nèi)容物泄漏、微生物侵入及外界氣體（如氧氣、水蒸氣）進入的能力。

挑戰(zhàn)懸液：用于試驗的特定微生物懸液，通常為高濃度（如10? CFU/mL）。

人工打孔樣品：通過人為方式在包裝上制造定量漏孔的樣本，用于驗證方法靈敏度。

確定性與概率性檢測法：前者基于可控的理化技術(shù)，產(chǎn)生量化數(shù)據(jù)；后者（如本試驗）具有隨機性，結(jié)果以概率分布描述。

陰性/陽性對照：分別用于驗證包裝完整性（無微生物生長）及試驗體系有效性（出現(xiàn)微生物生長）。

方法原理

浸入式微生物暴露試驗是一種概率性檢測方法，其核心在于通過微生物挑戰(zhàn)模擬包裝在實際使用中的潛在風險。具體步驟為：

1. 將裝有培養(yǎng)基的包裝容器浸入含挑戰(zhàn)微生物的懸液中。

2. 微生物可能通過包裝的潛在漏孔進入容器內(nèi)的培養(yǎng)基。

3. 將容器置于適宜的培養(yǎng)條件下（如溫度、時間），觀察培養(yǎng)基是否出現(xiàn)微生物生長，以此判斷包裝是否存在可被微生物穿透的漏路。

試驗中可調(diào)整參數(shù)（如壓力、真空度、浸沒時間、溫度），以模擬運輸、儲存或生產(chǎn)過程中可能遇到的條件。由于概率性方法的局限性，陰性結(jié)果無法代表批次內(nèi)所有產(chǎn)品的密封性，因此方法驗證至關(guān)重要。

試驗操作流程

為確保試驗結(jié)果的可靠性，需遵循以下規(guī)范化的操作步驟：

1. 樣品準備與浸沒

將待測樣品（包括人工打孔樣品）置于含挑戰(zhàn)懸液的容器中，確保浸沒。

根據(jù)實際使用場景或驗證研究確定浸沒時間，必要時使用固定裝置防止樣品上浮。

對于無法浸沒的大型樣品，可將挑戰(zhàn)懸液直接施加于包裝表面，但需事先驗證其適用性。

2. 清洗與保護

試驗后，用無菌水清洗樣品外壁殘留的挑戰(zhàn)懸液。

將樣品置于無菌袋或保護容器中，防止培養(yǎng)過程中污染培養(yǎng)箱。

3. 培養(yǎng)與觀察

將樣品及對照組置于適宜培養(yǎng)條件（如溫度、濕度）下培養(yǎng)，時間根據(jù)驗證要求確定。

培養(yǎng)結(jié)束后，檢查培養(yǎng)基是否出現(xiàn)渾濁。對于不透明或大型包裝，可轉(zhuǎn)移部分培養(yǎng)基至透明容器觀察。

4. 促生長試驗

在陰性對照樣品中接種少量挑戰(zhàn)微生物（10-100 CFU），驗證培養(yǎng)基的促生長能力。

5. 廢物處理

試驗結(jié)束后，采用熱力、化學或輻照等方法對剩余挑戰(zhàn)懸液進行滅活，防止環(huán)境污染。

結(jié)果判定標準

試驗結(jié)果的判定需滿足以下條件：

1. 挑戰(zhàn)懸液濃度：試驗結(jié)束時，懸液微生物濃度需達到預定目標（如10? CFU/mL）。

2. 陰性對照：無微生物生長，證明包裝完整性。

3. 陽性對照：出現(xiàn)微生物生長，驗證試驗體系有效性。

4. 促生長試驗：接種的挑戰(zhàn)微生物必須生長，確認培養(yǎng)基能力。

5. 測試樣品：

無微生物生長：包裝密封性合格。

出現(xiàn)微生物生長：需進一步鑒定是否為挑戰(zhàn)微生物，并分析漏孔原因。

結(jié)語

浸入式微生物暴露試驗為注射劑包裝密封性驗證提供了一種科學、直觀的方法。通過規(guī)范的操作流程、嚴格的質(zhì)量管理和明確的結(jié)果判定，而三泉中石的MFY-HS微生物侵入法密封性試驗儀，使用微生物侵入法，也是微生物挑戰(zhàn)法，該方法可有效評估包裝系統(tǒng)的完整性，為藥品安全保駕護航。